Очистка и концентрирование энтеровирусов

Тут самый большой выбор дженериков сиалиса в РФ. Быстрая, бесплатная доставка по всей территории, лучшие условия. Заходи!

Для очистки и концентрирования энтеровирусов применяют различные сорбенты: амберлит (Lo Grippo, Berger, 1952), фосфат кальция (Taverne et al., 1958), ДЭАЭ-целлюлозу (Ноуег et al., 1958; Ormbessee, Ноуег, 1958), эктеолацеллюлозу (Schmidt, 1963), гидроокись алюминия и его фосфат (Wallis, Melnick, 1961; (May Shy, 1961), экстракт латука (Konowalchuk et al., 1974; Ferrhah et al., 1978; Gerba et al., 1978).

M. С. Айзен, В. А. Казанцева (1974) адсорбируют энтеровирусы на гидроокиси алюминия на магнитной мешалке при комнатной температуре 15 мин с последующим центрифугированием при 3000 об/мин в течение 10 мин и ресуспендированием в солевом растворе Эрла рН 7,6.
Нерастворимые полиэлектролиты (ПЭ-60) успешно применяются для концентрирования вирусов полиомиелита типа I, ECHO 1, 7, 17, вирусов Коксаки А9 и ВЗ. Важную роль при концентрировании вируса играет реакция среды. Оптимальные значения рН лежат в пределах от 3,0 до 4,5. Неразведенный вирус хорошо адсорбируется при этом на ПЭ-60, а адсорбированный вирус затем легко элюирует при рН 8,0—9,0 (Wallis et al., 1971).

Для очистки энтеровирусов Ю. В. Первиков и соавт. (1972) успешно применили методы гельфильтрации на сефарозе 4Б, ионообменную хроматографию на ДЭАЭ-целлюлозе, а М. С. Балаян и соавт. (1971) —адсорбционную хроматографию на широкопористом стекле.

В. П. Широбоков (1974, 1975) предложил очистку и концентрирование вирусов Коксаки В с помощью бентонита, обеспечивающие 400—500-кратное концентрирование вирусов по инфекционности, а также очистку вирусных препаратов от балластных белков и нуклеиновых кислот.

При концентрировании полиэтиленгликолем (ПЭГ) вначале проводят осаждение примесей при 3000—4000 об/мин. К надосадочной жидкости добавляют раствор протаминсульфата, нейтрализованный до рН 7,5 (2 мг/л) и вновь осаждают образовавшийся осадок при низкоскоростном центрифугировании. К надоса-дочной жидкости добавляют 30% раствор ПЭГ 6000 до 5% концентрации. Образовавшийся при выдерживании на холоде (30 мин) осадок после дополнительного центрифугирования отделяют от надосадочной жидкости и растворяют в буфере, содержащем 50 ммоль трисраствора и 10 ммоль меркаптоэтанола. Затем добавляют додецилсульфат натрия до 0,5% и ПЭГ до 5 /о. Образовавшийся осадок содержит почти чистый вирус, небольшое количество белковых примесей можно отделить при помощи равновесного центрифугирования в градиенте хлорида цезия (Martin, Garr, 1971).