Очистка энтеровирусов обработкой фреоном

Тут самый большой выбор дженериков сиалиса в РФ. Быстрая, бесплатная доставка по всей территории, лучшие условия. Заходи!

Энтеровирусы наиболее эффективно очищаются обработкой фреоном 113 (трифтортрихлорэтан). Фреон добавляют к равному объему охлажденной вируссодержащей жидкости; полученную смесь гомогенизируют в скоростном смесителе и центрифугируют (Hower 1962). М. С. Айзен, В. А. Казанцева (1974) применили отечественный фреон, насыщенный н-гептаном до плотности 1,36.

Додецилсульфат натрия вызывает агрегацию вирионов аттенуированного полиовируса типа I Сэбина. Ее можно предотвратить буферными растворами высокой ионной силы. Способность додецилсульфата натрия вызывать агрегацию вирионов можно применять для очистки энтеровирусов. Предложен метод быстрой очистки вируса с применением саркозила (Fiszman et al., 1971).

Для концентрирования энтеровирусов сначала применяли осаждение осветленных (центрифугирование при небольших скоростях) вируссодержащих жидкостей на ультрацентрифуге при 39 000 об/мин (106 000 g) в течение 1—17г ч. После удаления надосадочной жидкости осадок ресуспендируют в небольшом объеме среды и проводят заключительное центрифугирование при 4500 об/мин в течение 30 мин или при 18 000 об/мин в течение 20 мин с целью осаждения посторонних частиц. Этот метод обеспечивает одновременно и очистку, и концентрацию вируса (Melnick, 1943; Peizer et al., 1961; Herrman, Cliver, 1968).
При очистке и концентрировании энтеровирусов можно применять метод дифференциальной фильтрации через миллипоровые фильтры с различным диаметром пор. Для элюции использовали различные растворы, в том числе мясной экстракт. Элюция вируса Коксаки В5 и полиовируса типа I с миллипоровых мембран в наибольшей мере достигается неразведенной сывороткой коровьего плода, причем в 5 мл элюата обнаруживается 80— 90% адсорбированного вируса (Wallis, Melnick, 1967; Berg, 1968; Konowalchuk, Speirs, 1971; Kontenbador, Cliver, 1973). Jakubowski и соавт. (1974) сконструировали установку для концентрирования энтеровирусов при помощи фильтров из больших объемов воды.

В. А. Казанцева и М. С. Айзен (1974) применили для концентрирования энтеровирусов мембранные фильтры отечественного производства с размером пор 0,3—0,45 мкм. Элюцию вирусов с фильтра производили 2 мл мясной воды.