Изучение электрофоретической миграции

Изучение электрофоретической миграции антигенов 6 штаммов полиовируса путем иммуноэлектрофореза в геле агарозы при рН 8,2 и рН 7,0 выявило различия в миграции Н – и N-антигенов. Н-антигены мигрировали быстрее, чем соответствующие N-анти-гены. Небольшие вариации в миграции разных типов полиовирусов, а также внутритиповые вариации наиболее выражены у штаммов типа I Брунгильда и Чад. Все антигены отрицательно заряжены при рН 8,2 и 7,0 за исключением N-антигена штамма Брунгильда, который имеет отрицательный заряд только при рН 8,2. При рН 7,0 этот антиген имеет небольшой положительный заряд, что указывает на расположение изоэлектрической точки в данных условиях чуть выше 7,0 (Forsgren, 1971). Г. X. Мирзаянц (1975) обнаружила различия в активности в зависимости от их электрического потенциала. Активной оказалась лишь одна из трех фракций, обладающая наименьшим положительным зарядом.

Физико-химические и серологические свойства D – и С-антигенов вирусов Коксаки А9, В4, В5 и вируса ECHO 9 изучали Schmidt и соавт. (1971, 1973). Максимальной инфекционностью и комплементсвязывающей активностью обладали D-антигены. Как и полиовирусный D-антиген, они обладали способностью переходить в С-антигены. Чувствительность к прогреванию при 40—65° была сходна у антигенов Коксаки В4 и полиовируса типа I. С повышением температуры серологическая активность уменьшалась. При иммунизации морских свинок D-антигеном вырабатывались вируснейтрализующие антитела и комплементсвя-зывающие антитела к D – и С-антигенам. При иммунизации прогретым С-антигеном образовывались лишь антитела против этого антигена. Перекрестные реакции между полиовирусом типа I и вирусом ECHO 6 в РСК не выявлялись (Forsgren, 1972).

В. П. Широбоков (1974) изучал антигены вируса Коксаки В1 и показал, что переход D-антигена в С-антиген наблюдается при 60°С, а также при длительном хранении вируса при комнатной температуре, когда появляются пустые формы вируса.

Существует ряд модификаций техники и учета РСК. Среди них следует отметить микрометод (Black, Melnick, 1954, 1955; Lepine, Sohier, 1954), титрование с различными дозами комплемента (Melnick, 1955a), учет по 50% гемолизу (Lepine, Sohier, 1954), учет по авидности сыворотки, т. е. по общему количеству комплемента, связанного всеми разведениями сыворотки (Godenne, ‘Riordan, 1955; Paul, Melnick, 1956), окраску комплемента флуоресцирующими красителями (Goldwasser, Shepard, 1958). Для целей диагностики вполне удовлетворительные результаты дает РСК с нативными культуральными антигенами и с обычным учетом результатов (М. Я. Чумакова, 1958; М. К. Ворошилова, В. И. Жевандрова, М. С. Балаян, 1964; Melnick, Wenner, 1974; Schmidt, Lennette, 1958).

Tags: , ,