Флоккуляция и реакция нейтрализации

Одновременное применение реакции флоккуляции и РСК выявляло правильный диагноз в 86%, реакции флоккуляции и реакции нейтрализации — до 75%. Низкий процент положительных ответов в реакции флоккуляции по сравнению с РСК авторы объясняют очень ранним появлением флоккулирующих антител: в 45% они появлялись раньше комплементсвязывающих и в 43 % — одновременно с ними. Помимо раннего появления флоккулирующих антител, было отмечено и раннее их исчезновение: антитела находили через 6 мес после начала болезни только у 3 из 16 больных, а через 9 мес — не находили ни у одного больного. Вместе с тем авторы отметили трудность приготовления антигенов и малую экономичность реакции флоккуляции. Из 1000 мл вируссодержащей культуральной жидкости можно приготовить антиген для обследования лишь 100 проб, тогда как в РСК его хватило бы на 400—800 сывороток.

Реакцию преципитации в агаре, оказавшуюся высокоспецифичной, впервые применил для изучения полиомиелита Le Bouvier (1957). Он показал полное отсутствие перекрестных реакции между полиовирусами трех типов и вирусами Коксаки А9, ECHO 7 и ECHO 9. Эмпирически была установлена линейная зависимость между логарифмом концентрации сыворотки и расстоянием линии преципитата от края сывороточной лунки при условии, что доза антигена остается постоянной.

По данным Le Bouvier, одна единица преципитина соответствует 128—256 нейтрализующим единицам сыворотки. В его наблюдениях преципитирующие антитела в процессе полиомиелитной инфекции нарастали параллельно вируснейтрализующим антителам низкой авидности и Y-комплемептсвязывающим антителам; какого-либо сходства с Н-комплементсвязывающими антителами (в РСК с гретыми антигенами) не отмечено.

Grasset и соавт. (1958) применили микрометод для реакции преципитации, аналогичный применявшемуся ими методу изучения антигенного состава змеиного яда. Объем антигена в центральной лунке составлял всего 0,005 мл. Реакцию можно было учесть уже через 24 ч инкубирования при температуре 20°С. Титром преципитинов считали последнее разведение, дающее полосу преципитации. Антигены готовили путем выращивания вируса в культурах KB с последующей концентрацией в 100 раз методом ультрацентрифугирования.

Tags: , ,